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利用CRISPRa技术提高乳酸克鲁维酵母凝乳酶分泌表达

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成果类型:
期刊论文
作者:
邓宇慧;王世清;郑艳丽
作者机构:
[邓宇慧; 王世清; 郑艳丽] 武汉轻工大学生命科学与技术学院
语种:
中文
关键词:
乳酸克鲁维酵母;LAC9激活因子;VPR激活因子;凝乳酶
关键词(英文):
CRISPR-dCas9
期刊:
湖北大学学报(自然科学版)
ISSN:
1000-2375
年:
2025
卷:
47
期:
01
页码:
84-90
机构署名:
本校为第一机构
院系归属:
生命科学与技术学院
摘要:
乳酸克鲁维酵母因其可靠的食品安全性被广泛应用于工业酶制剂生产,利用高通量的基因调控技术,如基于CRISPR-dCas9的基因表达激活平台(CRISPR activation,CRISPRa)是进一步促进酶制剂产量提高的最有效方法之一。本研究将激活因子VPR和LAC9分别与dCas9融合,针对PLAC4启动子上游区域序列设计gRNA,引导dCas9-激活因子融合蛋白对其进行特异性结合,促进RNA聚合酶在该区域的聚集,驱动受PLAC4启动子调控的凝乳酶表达。结果显示,dCas9-VPR与dCas9-LAC9的融合形式可分别将凝乳酶表达量提高1.67倍和1.65倍。本研究为利用乳酸克鲁维酵母进行工业酶制剂生产提供了有效的工具。

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