期刊论文

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生物技术

1004-311X

2018

28

3

278-285

10.16519/j.cnki.1004-311x.2018.03.0048

武汉市科学技术项目（“新型饲用耐高温脂肪酶的分子改造与品种创”,No.2016020101010084） 中科院广州能源所开放基金支持（“脂肪酶的分子改造及生物柴油酶法制备新工艺”）

本校为第一机构

[目的]拟实现疏棉状嗜热丝孢菌（Thermomyces lanuginosus）脂肪酶TLL在毕赤酵母菌中的高效表达;初步探索该脂肪酶催化生物柴油的可行性及催化条件,为大规模工业生产生物柴油提供一种可行方案。[方法]比较分析α-信号肽和脂肪酶tll基因自身的信号肽对其分泌表达量的影响;构建脂肪酶tll基因多拷贝表达框,提高该基因在宿主基因组中的剂量,从而实现高效表达;直接以液体脂肪酶TLL为催化剂,采用单因子方法初步探索了其制备生物柴油的条件。[结果]α-信号肽融合和多拷贝均能提升TLL脂肪酶的表达水平。在14 L发酵罐中培养144 h后,发酵上清液的酶活可达到769 U/m L;液体脂肪酶TLL可成功地催化制备生物柴...

[Objective] To trail a possibility for large-scale biodiesel preparation by realizing the high-level secretory expression of Thermomyces lanuginosus lipase TLL in Pichia pastoris,and optimizing the parameters for biodiesel preparation by using TLL lipase. [Methods]We comparatively analyzed the effect of native signal peptide and α-signal peptide on the secretive expression of TLL in P. pastoris. Meanwhile,multi-copy expression cassettes were constructed to obtain the high-level expression recombinants. The parameters were optimized for directl...