目的:本文基于卡介苗(BCG)和结核分枝杆菌H37Ra株感染人单核巨噬细胞系THP-1,外泌体分离、鉴定,转录组高通量测序,和生物信息学分析,选择差异表达的miRNA,并经初步临床评估,以期望找到潜在的结核病新型标志物。方法:(1)分别用BCG和H37Ra菌株分别对THP-1细胞系进行感染,以未感染作为对照,培养72h后超速离心法提取细胞培养上清的外泌体,western blotting和透射电子显微镜鉴定外泌体。(2)提取外泌体总RNA后,经新一代Illumina高通量测序,RNA-seq数据分析,多种生物信息学方法对测序结果进行差异表达分析,靶基因预测,GO分析和KEGG信号通路分析。(3)选择肺结核患者血清,健康人血清,用试剂盒提取其血清外...
