专利

发明专利

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2015-5-14

CN201510245943.5

2015-08-26

CN104865333A

430023 湖北省武汉市东西湖区常青花园学府南路68号

芶忠义

四川君士达律师事务所 51216

本校为第一完成单位

一种龙眼肉蛋白多糖的检测方法,其特征在于,所述的龙眼肉蛋白多糖的检测方法包括：步骤一、取龙眼干果肉,加蒸馏水进行匀浆处理,龙眼肉匀浆保温浸提后,抽滤分离滤液；滤液浓缩后,转入截留分子量为3500的透析袋中,置于蒸馏水中低温透析；透析袋内溶液真空浓缩后冷冻干燥,得到龙眼粗蛋白多糖粉末；步骤二、取龙眼粗蛋白多糖溶于蒸馏水中,充分溶解后离心后取上清液加入Sephadex?G?100凝胶柱中,并以蒸馏水洗脱,采用苯酚硫酸法测定洗脱液中的多糖含量,测定洗脱液在280nm处的吸光值以表征其蛋白含量,收集合并同时出现多糖和蛋白信号的洗脱液,冷冻干燥得到龙眼肉蛋白多糖的纯品；步骤三、取龙眼粗蛋白多糖溶于碳酸钠缓冲液中,加入异硫氰酸荧光素,于室温下避光搅拌反应,反应结束后,离心取上清液加入Sephadex?G?100凝胶柱中,并以蒸馏水洗脱,采用苯酚硫酸法测定洗脱液中的多糖含量,并分别测定洗脱液在280nm......

本发明公开了一种龙眼肉蛋白多糖的检测方法，包括龙眼肉蛋白多糖的制备、龙眼肉蛋白多糖的纯品制备、荧光标记龙眼肉蛋白多糖的纯品制备、龙眼肉蛋白多糖的检测。异硫氰酸荧光素能特异结合龙眼肉蛋白多糖分子中的结合蛋白，保障了定量检测的可行性和检测目标的专一性，采用高效分子排阻色谱结合荧光检测器分析检测龙眼肉蛋白多糖，在1～200μg/mL的浓度范围内线性关系良好，能实现龙眼蛋白多糖的定量分析，最低检出限为0.25μg/mL，最低定量限为0.85μg/mL；同时结合峰响应的保留时间，能有效表征蛋白多糖的分子量分布，达到对目标物质的定性分析。本发明不仅能同时实现蛋白多糖的定性、定量检...